霍夫曼调制相衬(Hoffman Modulation Contrast，简称HMC)是ROBERT HOFFMAN教授于1975年提出的一种观察方式①，是基于斜照明技术加入偏振镜、狭缝光阑和调制器改进而来的一种透明样品观察技术，特点是有三维立体感，且适用于塑料培养皿，有人称之为“穷人的DIC”，主要用于IVF注射等显微操作。

一、成像原理

斜照明（Oblique Illumination）技术又称离轴照明（Off-Axis Illumination），是一种非常古老的显微镜技术，1866年由德国物理学家August Toepler提出③，并由阿贝聚光镜的发明者Ernst Abbe完善，基本思路是利用偏轴光照射样品，然后经过透明样品发生衍射、反射和折射，最终除了未衍射的0级光，还能把一两个临近级别的衍射光（1级和-1级）用到成像中，从而提升分辨率和焦深，形成浮雕样式的立体成像，因此这种观察方式又称浮雕相衬（Relief Contrast，简称RC）。斜照明很多地方跟简易透射暗场相近，只是它的光阑不是环形的，而是半圆或其他狭缝形状，有更强方向性。题外话一句，极紫外光刻EUV也使用了斜照明技术。

霍夫曼调制相衬在斜照明基础上加入了三个部件，偏振镜，狭缝聚光镜和物镜调制器，使部分衍射光的强度大于背景光，部分衍射光的强度小于背景光，这样就形成更高对比度的立体成像。

当前霍夫曼调制相衬的专利已经过了保护期，四大品牌都推出了自己的HMC技术，奥林巴斯Evident叫浮雕相衬RC（Relief Contrast，继承以前RPC的命名），尼康叫高级调制相衬NAMC（Nikon Advanced Modulation Contrast），蔡司叫改进型调制相衬iHMC（Improved Hoffman Modulation Contrast），徕卡叫整合调制相衬IMC（Integrated Modulation Contrast），除了徕卡的是特有的机身调制器取代物镜调制器，其他跟原始设计差距不大。

二、关键部件

典型霍夫曼相衬需要三个部件，偏振镜，霍夫曼聚光镜（带狭缝光阑），霍夫曼物镜（带物镜调制器）。

光源偏振镜，偏振镜在光源和聚光镜之间，相当于一个起偏器，它可以旋转，旋转后可以调整成像的立体感和对比度。

霍夫曼聚光镜（带狭缝光阑），霍夫曼聚光镜又称狭缝聚光镜，一般采用转盘式设计，按照10X/20X/40X三个倍数有不同的狭缝光阑装在聚光镜前焦面，另有留空孔用于明场观察。聚光镜狭缝光阑分为三个部分：占大部分的暗区，不透光；离轴的狭缝，100%透光；狭缝检偏器，连着狭缝，尺寸跟狭缝相近，旋转光源偏振镜会改变这个区域的通光率，可以改变成像立体感和对比度。

霍夫曼物镜（带物镜调制器），霍夫曼物镜跟相衬物镜相似，在物镜后端的后焦平面上嵌入了精密的物镜调制器，这个调制器不能移动不能取出。物镜调制器分成三个区域：在边缘的暗区，透射1%光线；狭窄的灰区，透射10-15%光线；透明区，连着灰区，100%透光。霍夫曼物镜能用于明场、暗场和荧光观察，但用在荧光观察时效果不佳，因为有调制器，其透光率低于普通明场物镜。

注意：霍夫曼的狭缝光阑和物镜调制器有很强的方向匹配关系，物镜拧紧后，需要调整聚光镜狭缝方向来匹配，非专业人士请不要调霍夫曼物镜或聚光镜，否则很难调节回最佳状态。

另外整合调制相衬IMC的物镜调制器设置在了物镜后焦面的共轭面上，也就是在机身内置而非物镜内置，因此可以使用霍夫曼物镜以外的物镜。但必须提醒的是，IMC是组合消色差设计，物镜与观察头是成套搭配实现消色差的，随便换物镜可能破坏消色差设计导致效果不佳。